Kea leboha ka ho etela www.chinacdoe.com.Mofuta oa sebatli oo u o sebelisang o na le tšehetso e fokolang ea CSS.Bakeng sa boiphihlelo bo botle ka ho fetesisa, re khothaletsa hore o sebelise sebatli se ntlafalitsoeng (kapa o tima Compatibility Mode ho Internet Explorer).Khabareng, ho netefatsa ts'ehetso e tsoelang pele, re tla fana ka sebaka sa marang-rang ntle le mekhoa le JavaScript.
Litsamaiso tsa Lab-on-a-chip tse nang le bokhoni ba setšeng li fana ka monyetla oa ho hlahlojoa ka potlako le ka nepo 'me li na le thuso libakeng tse thibelang lisebelisoa moo lisebelisoa tsa biomedical le litsebi tse koetlisitsoeng li sa fumaneheng.Leha ho le joalo, ho theha mokhoa oa ho hlahloba boemo ba tlhokomelo eo ka nako e le 'ngoe e nang le likarolo tsohle tse hlokahalang bakeng sa ho fana ka mesebetsi e mengata, ho lokolloa ha litlhoko, ts'ebetso e ka tšeptjoang, le ho boloka nako e telele ea li-reagents e ntse e le phephetso e kholo.Mona re hlalosa thekenoloji ea "lever-actuated micro travel switch" e ka tsamaisang maro ka tsela leha e le efe, e fana ka karabelo e nepahetseng le e lekanang ho khatello ea moea e sebelisoang, 'me e lule e tsitsitse khahlanong le ho sisinyeha ha tšohanyetso le ho sisinyeha.Ho ipapisitsoe le thekenoloji, re boetse re hlalosa nts'etsopele ea sistimi ea polymerase chain reaction e kopanyang ts'ebetso ea reagent, ho kopanya le ho itšoara ka tsela e le 'ngoe, e finyellang ts'ebetso ea "sample-in-answer-out" bakeng sa lisampole tsohle tsa kliniki tsa nasal ho tsoa ho bakuli ba 18 ba nang le lefu la tsoekere. Influenza le 18 taolo ea motho ka mong, ka tumellano e ntle ea matla a fluorescence le standard polymerase chain reaction (Pearson coefficients> 0.9).Ho ipapisitsoe le thekenoloji, re boetse re hlalosa nts'etsopele ea polymerase chain reaction system e kopanyang ts'ebetso ea ts'ebetso ea reagent, motsoako le ts'ebetso ea ts'ebetso e le 'ngoe, e fanang ka ts'ebetso ea "sample-in-answer-out" bakeng sa lisampole tsa nko tsa kliniki ho tsoa ho bakuli ba 18. ka Influenza le ditaolo tse 18 tsa motho ka mong, ka tumellano e ntle ya matla a fluorescence le standard polymerase chain reaction (Pearson coefficients> 0.9).Основываясь на этой технологии, мы также описываем разработку системы полимеразной цепной реакции, которая объединяет фунция фунцияет фунция фунцияет фунция реакции в одном процессе, что обеспечивает выполнение «образец-в-ответ-выход» для всех клинических образцов образцов из 18 сположение le 18 отдельных контролей, хорошем соответствии интенсивности флуоресценции стандартной полимеразной цепной реакцией (9)Ho ipapisitsoe le thekenoloji ena, re boetse re hlalosa nts'etsopele ea polymerase chain reaction system e kopanyang mesebetsi ea ho enta, ho kopanya le ho itšoara ka mokhoa o le mong, e leng ho nolofalletsang ho fana ka sampuli bakeng sa mehlala eohle ea kliniki ea nko ho tsoa ho bakuli ba 18 ba feberu.le 18 taolo ea motho ka mong, tumellanong e ntle le maemo a tloaelehileng a polymerase chain reaction fluorescence intensity (Pearson's coefficients> 0.9).Ho ipapisitsoe le thekenoloji ena, re boetse re hlalosa nts'etsopele ea polymerase chain reaction system e kopanyang ente ea reagent, motsoako, le ts'ebetso ea karabelo ho sekaseka mefuta eohle ea kliniki ea nko ho tsoa ho mehlala e 18 ea bakuli ba nko. hantle ka mokhoa o tloaelehileng oa ketane ea polymerase (coefficient ea Pearson> 0.9).Sethala se reriloeng se tiisa boiketsetso bo tšepahalang ba tlhahlobo ea biomedical mme ka hona se ka potlakisa thekiso ea lisebelisoa tse ngata tsa tlhahlobo ea ntlha ea tlhokomelo.
Mafu a ntseng a hlaha a batho, joalo ka seoa sa 2020 COVID-19 se bolaileng batho ba limilione, a beha tšokelo e kholo ho bophelo bo botle ba lefatše le tsoelo-pele ea batho1.Ho lemoha kapele, ka potlako le ka nepo ha mafu ho bohlokoa ho laola ho ata ha kokoana-hloko le ho ntlafatsa liphello tsa phekolo.Ts'ebetso ea mantlha ea tlhahlobo ea tikoloho e ipapisitseng le li-lab tse bohareng moo lisampole tsa liteko li romelloang lipetlele kapa litleliniki tsa tlhahlobo ea mafu 'me li tsamaisoa ke litsebi hajoale li thibela phihlello ea batho ba ka bang limilione tse likete tse 5.8 lefatšeng ka bophara, haholo ba phelang maemong a haelloang ke lisebelisoa.moo ho nang le khaello ea thepa e turang ea biomedical le litsebi tse tšoanelehang.baoki 2. Ka hona, ho na le tlhokahalo e potlakileng ea ho hlahisa tsamaiso ea lab-on-a-chip e theko e tlaase le e bonolo ho mosebedisi e nang le bokhoni ba tlhahlobo ea ntlha ea tlhokomelo (POCT) e ka fang lingaka tlhahisoleseding ea tlhahlobo ea nako ho etsa liqeto tse nang le tsebo. .le kalafo 3.
Litaelo tsa Mokhatlo oa Lefatše oa Bophelo (WHO) li bolela hore POCT e loketseng e lokela ho ba theko e tlaase, e sebelisehang habonolo (ho bonolo ho e sebelisa ka koetliso e fokolang), e nepahale (qoba lintho tse fosahetseng kapa tse fosahetseng), e potlakile le e ka tšeptjoang (e fana ka thepa e ntle ea ho pheta-pheta), le e ka tsamaisoang (e khonang ho boloka nako e telele ebile e fumaneha habonolo ho basebelisi ba ho qetela)4.Ho fihlela litlhokahalo tsena, litsamaiso tsa POCT li tlameha ho fana ka lintlha tse latelang: dosing e feto-fetohang ho fokotsa ts'ebetso ea letsoho, tokollo e batloang ho lekanya lipalangoang tsa reagent bakeng sa liphetho tse nepahetseng tsa liteko, le ts'ebetso e tšepahalang ho mamella ho thothomela ha tikoloho.Hajoale, sesebelisoa sa POCT se sebelisoang ka ho fetesisa ke lateral flow strip5,6 e nang le likarolo tse 'maloa tsa li-membrane tsa porous nitrocellulose tse sutumelletsang sampole e nyane haholo ho ea pele, e sebetsanang le li-reagents tse sa sebetseng pele ka matla a capillary.Le hoja li na le molemo oa theko e tlaase, boiketlo ba tšebeliso, le liphello tse potlakileng, lisebelisoa tsa POCT tse thehiloeng ho phallo li ka sebelisoa feela bakeng sa liteko tsa likokoana-hloko (mohlala, liteko tsa glucose7,8 le liteko tsa bokhachane9,10) ntle le ho hloka tlhahlobo ea mekhahlelo e mengata.karabelo (mohlala, ho kenya li-reagents tse ngata, ho kopanya, ho kopanya).Ho phaella moo, matla a ho khanna a laolang motsamao oa mokelikeli (ke hore, matla a capillary) ha a fane ka ts'ebetso e ntle, haholo-holo pakeng tsa lihlopha, e leng se etsang hore ho be le ho fokola ha ho ikatisa11 le ho etsa hore lihlopha tsa lateral li sebelisoe haholo-holo bakeng sa ho lemoha hantle12,13.
Bokhoni bo atolositsoeng ba tlhahiso ho micro- le nanoscale bo thehile menyetla bakeng sa nts'etsopele ea lisebelisoa tsa microfluidic POCT bakeng sa litekanyo tsa palo14,15,16,17.Ka ho lokisa thepa ea sebopeho sa 18, 19 le geometry ea liteishene 20, 21, 22, matla a capillary le lebelo la phallo ea lisebelisoa tsena li ka laoloa.Leha ho le joalo, ho tšepahala ha tsona, haholo-holo bakeng sa maro a nang le metsi a mangata, ho lula ho sa amohelehe ka lebaka la ho se nepahale ha tlhahiso, bofokoli ba thepa, le kutloisiso ea ho sisinyeha ha tikoloho.Ho phaella moo, kaha phallo ea capillary e bōptjoa ho sebopeho sa khase ea metsi, ha ho phallo e eketsehileng e ka hlahisoang, haholo-holo ka mor'a ho tlatsa mocha oa microfluidic ka metsi.Ka hona, bakeng sa tlhahlobo e rarahaneng haholoanyane, mehato e mengata ea ente ea sampole e tlameha ho etsoa24,25.
Har'a lisebelisoa tsa microfluidic, lisebelisoa tsa centrifugal microfluidic hajoale ke e 'ngoe ea tharollo e molemohali ea POCT26,27.Mokhoa oa eona oa ho khanna o molemo ka hore matla a ho khanna a ka laoloa ka ho fetola lebelo la ho potoloha.Leha ho le joalo, bothata ke hore matla a centrifugal a lula a lebisitsoe moeling o ka ntle oa sesebelisoa, ho etsa hore ho be thata ho kenya ts'ebetsong mekhoa e mengata ea mehato e hlokahalang bakeng sa litlhahlobo tse rarahaneng.Leha matla a eketsehileng a ho khanna (mohlala, li-capillaries 28, 29 le tse ling tse ngata 30, 31, 32, 33, 34, 35) ho kenyelletsa matla a centrifugal a hlahisoa bakeng sa dosing e sebetsang, phetisetso ea metsi e sa lebelloang e ntse e ka etsahala hobane matla ana a eketsehileng hangata ke litaelo. ea boholo bo ka tlase ho matla a centrifugal, e etsang hore e sebetse feela ho feta mekhahlelo e menyenyane ea ts'ebetso kapa e se fumanehe ha e batloa ka ho lokolloa ha mokelikeli.Ho kenyelletsa mekhoa ea pneumatic ka har'a microfluidics ea centrifugal joalo ka mekhoa ea centrifugal kinetic 36, 37, 38, mekhoa ea thermopneumatic 39 le mekhoa e sebetsang ea pneumatic 40 e ipakile e le mokhoa o mong o khahlehang.Ka mokhoa oa counterfugodynamic, sekoti se eketsehileng le li-microchannels tse kopanyang li kopantsoe ka har'a sesebelisoa bakeng sa liketso tse ka ntle le tsa ka hare, le hoja katleho ea eona ea ho pompa (ho tloha ho 75% ho ea ho 90%) e itšetlehile haholo ka palo ea potoloho ea ho pompa le viscosity. ea mokelikeli.Ka mokhoa oa thermopneumatic, lera la latex le phaposi ea phetisetso ea mokelikeli ka ho khetheha li etselitsoe ho tiisa kapa ho bula sekena hape ha moea o koaletsoeng o futhumatsoa kapa o pholile.Leha ho le joalo, seta se futhumatsang / se pholileng se hlahisa mathata a ho arabela butle mme se fokotsa ts'ebeliso ea sona litekong tsa thermosensitive (mohlala, polymerase chain reaction (PCR) amplification).Ka mokhoa o sebetsang oa pneumatic, ho lokolloa ha litlhoko le ho sisinyeha ka hare ho finyelloa ka ts'ebeliso ea nako e le 'ngoe ea khatello e ntle le lebelo la ho potoloha ka mokhoa o nepahetseng ka li-motor tse lebelo le phahameng.Ho na le mekhoa e meng e atlehileng e sebelisang li-actuator tsa pneumatic feela (khatello e ntle 41, 42 kapa khatello e mpe 43) le meralo e tloaelehileng ea li-valve.Ka ho sebelisa khatello ka tatellano ka kamoreng ea pneumatic, mokelikeli o pompeloa ka pele ka peristaltically, 'me valve e tloaelehileng e koetsoe e thibela ho khutla ha metsi ka lebaka la peristalsis, kahoo ho lemoha ts'ebetso e rarahaneng ea metsi.Leha ho le joalo, hajoale ho na le palo e lekanyelitsoeng feela ea mahlale a microfluidic a ka etsang ts'ebetso e rarahaneng ea metsi ka sesebelisoa se le seng sa POCT, ho kenyelletsa ho fana ka lisebelisoa tse ngata, ho lokolloa ha litlhoko, ts'ebetso e tšepahalang, polokelo ea nako e telele, ho sebetsana le lino tse nang le viscosity e phahameng, le tlhahiso e baballang chelete.Kaofela ka nako e le nngwe.Ho haella ha ts'ebetso ea mehato e mengata e ka 'na ea e-ba le leng la mabaka a etsang hore lihlahisoa tse seng kae tsa khoebo tsa POCT tse kang Cepheid, Binx, Visby, Cobas Liat, le Rhonda li kenyellelitsoe ka katleho 'marakeng o bulehileng ho fihlela joale.
Ka pampiri ena, re sisinya pneumatic microfluidic actuator e thehiloeng ho green ring micro switch technology (FAST).FAST e kopanya thepa eohle e hlokahalang ka nako e le 'ngoe bakeng sa mefuta e mengata ea li-reagents ho tloha ho microliters ho ea ho milliliters.FAST e na le li-membrane tsa elastic, li-levers le li-blocks.Ntle le ts'ebeliso ea khatello ea moea, li-membrane, li-levers le li-blocks li ka koaloa ka thata 'me mokelikeli o ka hare o ka bolokoa nako e telele.Ha khatello e loketseng e sebelisoa 'me e lokisetsoa bolelele ba lehare, diaphragm ea atoloha ebe e sutumelletsa leqhubu sebakeng se bulehileng, e le hore mokelikeli o fete.Sena se lumella metering ea mefuta-futa ea lino tse metsi ka mokhoa o phoroselang, ka nako e le 'ngoe, ka tatellano kapa ka mokhoa o khethang.
Re thehile sistimi ea PCR e sebelisang FAST ho hlahisa sephetho sa karabelo-ka-sample bakeng sa ho lemoha likokoana-hloko tsa ntaramane A le B (IAV le IBV).Re fihletse tekanyo e tlase ea ho lemoha (LOD) ea likopi tse 102 / mL, tlhahlobo ea rona ea multiplex e bontšitse ho khetheha bakeng sa IAV le IBV le ho lumella kokoana-hloko ea ntaramane pathotyping.Liphetho tsa liteko tsa bongaka tse sebelisang sampole ea swab ea nko ho tsoa ho bakuli ba 18 le batho ba phetseng hantle ba 18 li bonts'a tumellano e ntle ho matla a fluorescence ka RT-PCR e tloaelehileng (Pearson coefficients> 0.9).Liphetho tsa liteko tsa bongaka tse sebelisang sampole ea swab ea nko ho tsoa ho bakuli ba 18 le batho ba phetseng hantle ba 18 li bonts'a tumellano e ntle ho matla a fluorescence ka RT-PCR e tloaelehileng (Pearson coefficients> 0.9).Результаты клинических испытаний с использованием образца мазка из носа от 18 пациентов и 18 здоровых лиц показывает хонстовыт соборовыт сображение сценции стандартной ОТ-ПЦР (коэфффициенты Пирсона > 0,9).Liphetho tsa liteko tsa bongaka tse sebelisang sampole ea swab ea nko ho tsoa ho bakuli ba 18 le batho ba phetseng hantle ba 18 li bonts'a tumellano e ntle lipakeng tsa matla a fluorescence a RT-PCR e tloaelehileng (Pearson's coefficients> 0.9).0.9................ Результаты клинических испытаний с использованием образцов назальных мазков от 18 пациентов и 18 здоровых лиц показать совинсовых лиц показать совиных ю флуоресценции и стандартной ОТ-ПЦР (коэфффициент Пирсона > 0,9).Liphetho tsa liteko tsa bongaka tse sebelisang li-nasal swab tsa bakuli ba 18 le batho ba 18 ba phetseng hantle li bontšitse tumellano e ntle lipakeng tsa matla a fluorescence le RT-PCR e tloaelehileng (coefficient ea Pearson> 0.9).Theko e hakanyetsoang ea thepa ea sesebelisoa sa FAST-POCT e ka ba US$1 (Letlapa la Tlatsetso 1) 'me e ka fokotsoa ho feta ka ho sebelisa mekhoa e meholo ea tlhahiso (mohlala, ho bopa ente).Ebile, lisebelisoa tsa POCT tse thehiloeng ho FAST li na le likarolo tsohle tse hlokahalang tse laetsoeng ke WHO mme li tsamaisana le mekhoa e mecha ea tlhahlobo ea lik'hemik'hale tse kang plasma thermal cycling44, amplification-free immunoassays45 le liteko tsa nanobody functionalization46 tseo e leng mokokotlo oa litsamaiso tsa POCT.kgoneha.
Ka feiga.1a e bonts'a sebopeho sa sethala sa FAST-POCT, se nang le likamore tse 'nè tsa metsi: kamore ea ho boloka pele, kamore ea ho kopanya, kamore ea ho itšoara, le kamore ea litšila.Senotlolo sa taolo ea phallo ea mokelikeli ke moralo oa FAST (o nang le li-membrane tsa elastic, li-levers le li-blocks) tse ka kamoreng ea pele ea polokelo le kamore ea ho kopanya.Joalo ka mokhoa o ts'oaretsoeng ka moea, moralo oa FAST o fana ka taolo e nepahetseng ea phallo ea mokelikeli, ho kenyelletsa ho koala / ho buloa, ho feto-fetoha ha maemo, ho lokolloa ha mokelikeli o hlokahalang, ts'ebetso e tšepahalang (mohlala, ho se utloelle ho sisinyeha ha tikoloho), le polokelo ea nako e telele.Sethala sa FAST-POCT se na le likarolo tse 'nè: lesela le ka morao, lesela la filimi e tsitsitseng, lesela la filimi ea polasetiki, le sekoahelo sa sekoahelo, joalokaha ho bontšitsoe ponong e atolositsoeng ho Fig. 1b (hape e bontšitsoe ka ho qaqileng ho Supplementary Figures S1 le S2 ).Likanale tsohle le likamore tsa lipalangoang tsa mokelikeli (joalo ka likamore tsa polokelo ea pele le tsa karabelo) li kentsoe ka har'a substrates ea PLA (polylactic acid) ho tloha ho 0.2 mm (karolo e tšesaane) ho isa ho 5 mm botenya.Thepa ea rekere ea filimi ke 300 µm thick PDMS e atolohang habonolo ha khatello ea moea e sebelisoa ka lebaka la "botenya bo tšesaane" le modulus e tlase ea elasticity (hoo e ka bang 2.25 MPa47).Lera la filimi ea polyethylene le entsoe ka polyethylene terephthalate (PET) e nang le botenya ba 100 µm ho sireletsa filimi e tsitsitseng ho tloha ho senyeha ho feteletseng ka lebaka la khatello ea moea.Ho tsamaellana le likamore, karolo ea substrate e na le li-levers tse amanang le sekoaelo (se entsoeng ka PLA) ka li-hinges ho laola ho phalla ha metsi.Filimi ea elastic e ne e khomaretsoe lera e tšehetsang ka ho sebelisa tepi e khomarelang ka mahlakoreng a mabeli (ARseal 90880) 'me e koahetsoe ka filimi ea polasetiki.Likarolo tse tharo li ile tsa bokelloa holim'a substrate ho sebelisoa moralo oa T-clip sekoahelong.T-clamp e na le lekhalo pakeng tsa maoto a mabeli.Ha sekotwana se kenngoa ka har'a groove, maoto a mabeli a ile a inama hanyenyane, eaba a khutlela sebakeng sa bona sa pele 'me a tlama sekoahelo ka thata le ho tšehetsa ha a ntse a feta ka har'a groove (Supplementary Fig. S1).Ka mor'a moo, lihlopha tse 'nè li bokelloa ho sebelisoa lihokelo.
Setšoantšo sa moralo oa sethala se bonts'ang likarolo tse fapaneng tsa ts'ebetso le likarolo tsa FAST.b Setšoantšo se atolositsoeng sa sethala sa FAST-POCT.c Senepe sa sethala se haufi le kotara ea dollar ea Amerika.
Mokhoa o sebetsang oa sethala sa FAST-POCT se bontšoa ho Setšoantšo sa 2. Likarolo tsa bohlokoa ke li-blocks tse holim'a lera la motheo le li-hinges tse holim'a sekoahelo sa sekoahelo, e leng se etsang hore ho be le moralo oa ho kena-kenana ha lihlopha tse 'nè li bokelloa ho sebelisa sebopeho sa T. .Ha ho se na khatello ea moea e sebelisoang (setšoantšo sa 2a), ho kena-kenana le ho kena-kenana ho etsa hore hinge e kobehe le ho senyeha, 'me matla a ho tiisa a sebelisoa ka lehare ho hatella filimi ea elastic khahlanong le block,' me mokelikeli o ka sekoting sa tiiso o hlalosoa. joalo ka boemo bo tiisitsoeng.Hoa lokela ho hlokomeloa hore sebakeng sena, leqhubu le kobehile ka ntle, joalokaha ho bontšoa ka lehlakoreng la pono ea setšoantšo sa 2a.Ha moea o fanoa (setšoantšo sa 2b), lera la elastic le atoloha ka ntle ho sekoahelo ebe le sutumelletsa leqhubu holimo, kahoo le bula lekhalo pakeng tsa leqhubu le thibela hore mokelikeli o phalle ka kamoreng e latelang, e hlalosoang e le boemo bo bulehileng. .Ka mor'a ho lokolloa ha khatello ea moea, leqhubu le ka khutlela sebakeng sa eona sa pele 'me la lula le le thata ka lebaka la elasticity ea hinge.Livideo tsa metsamao ea lever li hlahisoa filiming ea tlatsetso ea S1.
A. Setšoantšo sa meralo le linepe ha ho koetsoe.Ha ho se na khatello, lehare le hatella lera khahlanong le thibela, 'me mokelikeli o tiisitsoe.b Boemong bo botle.Ha khatello e sebelisoa, lera lea atoloha ebe le sutumelletsa leqhubu holimo, kahoo mocha oa buleha 'me mokelikeli o ka phalla.c Fumana boholo ba sebopeho sa khatello e matla.Likarolo tsa sebopeho li kenyelletsa bolelele ba leqhubu (L), sebaka se pakeng tsa slide le hinge (l) le botenya ba leqhubu (t).Fs ke compaction force at throttle point B. q ke mojaro o arolelanoang ka mokhoa o ts'oanang holim'a lehare.Tx* e emela torque e entsoeng ke lehare le hinged.Khatello e boima ke khatello e hlokahalang ho phahamisa lever le ho etsa hore metsi a phalle.d Liphetho tsa khopolo-taba le tsa liteko tsa kamano lipakeng tsa khatello e matla le boholo ba element.n = 6 liteko tse ikemetseng li ile tsa etsoa 'me data e bontšoa e le ± kheloha e tloaelehileng.Lintlha tse tala li hlahisoa e le lifaele tsa data tse tala.
Mohlala oa tlhahlobo o thehiloeng holim'a khopolo ea borali o entsoe ho hlahloba ho itšetleha ha khatello e matla ea Pc moo lekhalo le bulang holim'a li-geometric parameters (mohlala, L ke bolelele ba lever, l ke sebaka se pakeng tsa block le hinge, S ke leqhubu Sebaka sa ho kopana le mokelikeli t ke botenya ba sekhahla sa lever, joalokaha ho bontšitsoe setšoantšong sa 2c).Joalo ka ha ho hlalositsoe ho Tlatsetso Notes le Supplementary Figure S3, lekhalo le bula ha \({P}_{c}\ge \frac{2{F}_{s}l}{SL}\), moo Fs e leng torque. \ ({T}_{x}^{\ast}(={F}_{s}l)\) ho felisa matla a amanang le ho kena-kenana le ho kena-kenana le ho etsa hore hinge e kobehe.Karabo ea liteko le mohlala oa ho hlahloba li bontša tumellano e ntle (setšoantšo sa 2d), se bontšang hore khatello e boima ea Pc e eketseha ka ho eketseha ha t / l le ho fokotseha ha L, e hlalosoang habonolo ke mohlala oa khale oa sefate, ke hore, torque e eketseha ka t / Lift. .Ka hona, tlhahlobo ea rona ea theory e bontša ka ho hlaka hore khatello e boima e ka laoloa ka katleho ka ho fetola bolelele ba lever L le tekanyo ea t / l, e fanang ka motheo oa bohlokoa bakeng sa moralo oa sethala sa FAST-POCT.
Sethala sa FAST-POCT se fana ka phano ea mesebetsi e mengata (e bontšitsoeng ho Setšoantšo sa 3a ka inset le liteko), e leng tšobotsi ea bohlokoa ka ho fetisisa ea POCT e atlehileng, moo metsi a ka phallang ka tsela leha e le efe le ka tatellano leha e le efe (cascade, simultaneous, sequential) kapa multichannel e khethiloeng. ho aba .– tshebetso ya dosing.Ka feiga.3a (i) e bonts'a mokhoa oa cascaded dosing moo likamore tse peli kapa ho feta li ts'oaroa ho sebelisoa li-blocks ho arola li-reactants tse fapaneng le lever ho laola libaka tse bulehileng le tse koetsoeng.Ha khatello e sebelisoa, mokelikeli o phalla ho tloha ka holimo ho ea kamoreng e ka tlaase ka mokhoa oa cascade.Hoa lokela ho hlokomeloa hore likamore tsa cascade li ka tlatsoa ka lik'hemik'hale tse metsi kapa lik'hemik'hale tse omeletseng tse kang lyophilized powders.Tekong ea setšoantšo sa 3a (i), enke e khubelu e tsoang kamoreng e ka holimo e phalla hammoho le phofo ea dae e putsoa (sulfate ea koporo) ka kamoreng ea bobeli ebe e fetola boputsoa bo lefifi ha e fihla kamoreng e ka tlaase.E boetse e bonts'a khatello ea taolo bakeng sa mokelikeli o pompetsoeng.Ka mokhoa o ts'oanang, ha lehare e le 'ngoe e hokahane le likamore tse peli, e fetoha mokhoa oa ente ka nako e le' ngoe, joalo ka ha ho bonts'itsoe feiga.3a(ii), moo mokelikeli o ka ajoang ka mokhoa o ts'oanang holim'a likamore tse peli kapa ho feta ha khatello e sebelisoa.Kaha khatello e boima e itšetlehile ka bolelele ba leqhubu, bolelele ba sekhahla bo ka fetoloa ho finyella mokhoa oa ente ea sequential joalokaha ho bontšitsoe feiga.3a(iii).Leqhubu le lelelele (le nang le khatello e boima ea Pc_long) le ne le kopantsoe le kamoreng ea B le lever e khutšoanyane (e nang le khatello e matla ea Pc_short> Pc_long) e ne e kopantsoe le kamoreng ea A. Ha khatello ea P1 (Pc_long <P1 <Pc_short) e sebelisoa, ke metsi feela a khubelu. e ka phalla ho ea kamoreng ea B 'me ha khatello e eketsoa ho P2 (> Pc_short), mokelikeli o moputsoa o ka phalla ho ea kamoreng ea A. Mokhoa ona oa ente ea sequential o sebetsa ho mekelikeli e fapaneng e fetisetsang likamoreng tsa bona tse amanang ka tatellano, e leng bohlokoa bakeng sa POCT e atlehileng. sesebelisoa.Leqhubu le lelelele (le nang le khatello e boima ea Pc_long) le ne le kopantsoe le kamoreng ea B le lever e khutšoanyane (e nang le khatello e matla ea Pc_short> Pc_long) e ne e kopantsoe le kamoreng ea A. Ha khatello ea P1 (Pc_long
a Tshwantshiso ya mesebetsi e mengata e fapaneng, ke hore (i) cascading, (ii) ka nako e le nngwe, (iii) ka tatellano, le (iv) kabo ya kgetho.Li-curve li emela mokhoa oa ho sebetsa le mekhahlelo ea mekhoa ena e mene ea kabo.b Liphetho tsa liteko tsa nako e telele tsa polokelo ka metsing a deionized le ethanol.n = liteko tse ikemetseng tsa 5 li entsoe mme data e bonts'oa e le ± sd c.Lipontšo tsa tlhahlobo ea botsitso ha sesebelisoa sa FAST le sesebelisoa sa capillary valve (CV) se ne se le maemong a (i) static le (ii) a sisinyehang.(iii) Bolumo khahlano le nako ea lisebelisoa tsa FAST le CV ka maqhubu a fapaneng a angular.d Phatlalatso ea liphetho tsa liteko ho latela tlhoko ea (i) sesebediswa se FAST le (ii) sesebediswa sa CV.(iii) Kamano pakeng tsa molumo le nako bakeng sa lisebelisoa tsa FAST le CV ho sebelisa mokhoa oa khatello ea nakoana.Likarolo tsohle tsa sekala, 1 cm.Lintlha tse tala li fanoa e le lifaele tsa data tse tala.
Ho boloka nako e telele ea li-reagents ke tšobotsi e 'ngoe ea bohlokoa ea sesebelisoa se atlehileng sa POCT se tla lumella basebetsi ba sa rutehang ho sebetsana le li-reagents tse ngata.Leha mahlale a mangata a bonts'itse bokhoni ba ona ba ho boloka nako e telele (mohlala, li-microdispensers tse 35, lipakete tse 48 tsa blister, le lipakete tsa lithupa tse 49), ho hlokahala phaposi e amohelang sephutheloana ho amohela sephutheloana, e leng se eketsang litšenyehelo le ho rarahana;Ho feta moo, mekhoa ena ea polokelo ha e lumelle ho felloa ha lintho tse batloang feela 'me e baka tšenyo ea li-reagents ka lebaka la lintho tse setseng ka har'a sephutheloana.Bokhoni ba ho boloka nako e telele bo netefalitsoe ka ho etsa tlhahlobo ea bophelo bo potlakileng ho sebelisoa lisebelisoa tsa PMMA tse entsoeng ka mochini oa CNC ka lebaka la ho ba mahoashe hanyenyane le ho hanyetsa ho kenella ha khase (Supplementary Figure S5).Lisebelisoa tsa teko li ne li tletse metsi a hloekisitsoeng (metsi a hloekisitsoeng) le 70% ethanol (e etsisang li-reagents tse sa tsitsang) ho 65 ° C ka matsatsi a 9.Ka bobeli metsi a deionized le ethanol li ne li bolokiloe ho sebelisoa foil ea aluminium ho thibela phihlello ho tsoa holimo.Arrhenius equation le matla a ho kenya ts'ebetsong a matla a tlalehiloeng ho lingoliloeng50,51 li ne li sebelisetsoa ho bala nako ea sebele ea nako.Ka feiga.3b e bonts'a liphetho tse tloaelehileng tsa tahlehelo ea boima ba li-sampuli tsa 5 tse bolokiloeng ho 65 ° C bakeng sa matsatsi a 9, e lekanang le 0.30% bakeng sa metsi a deionized le 0.72% bakeng sa 70% ea ethanol ka lilemo tse 2 ho 23 ° C.
Ka feiga.3c e bonts'a tlhahlobo ea vibrate.Kaha valve ea capillary (CV) ke mokhoa o tummeng ka ho fetisisa oa ho tšoara mokelikeli har'a lisebelisoa tse teng tsa POCT28,29, sesebelisoa sa CV 300 µm bophara le 200 µm botebo se ile sa sebelisoa bakeng sa papiso.Ho ka bonoa hore ha lisebelisoa ka bobeli li lula li eme, mokelikeli o ka sethaleng sa FAST-POCT o tiisa 'me mokelikeli o mochine oa CV o notlella ka lebaka la ho atoloha ha mocha ka tšohanyetso, ho fokotsang matla a capillary.Leha ho le joalo, ha maqhubu a angular a orbital a ntse a eketseha, mokelikeli o sethaleng sa FAST-POCT o lula o tiisitsoe, empa mokelikeli o ka mochine oa CV o phalla ka kamoreng e ka tlaase (sheba le Supplementary Movie S3).Sena se fana ka maikutlo a hore li-hinges tse senyehang tsa sethaleng sa FAST-POCT li ka sebelisa matla a matla a mochine ho mojulung ho koala ka thata mokelikeli ka kamoreng.Leha ho le joalo, ho lisebelisoa tsa CV, mokelikeli o bolokiloe ka lebaka la ho leka-lekana pakeng tsa mekhahlelo e tiileng, ea moea le ea metsi, ho baka ho hloka botsitso, le ho thothomela ho ka senya tekanyo le ho baka boitšoaro bo sa lebelloang ba phallo.Molemo oa sethala sa FAST-POCT ke hore se fana ka ts'ebetso e ka tšeptjoang le ho qoba ho hlōleha ha ho e-na le li-vibrations tse atisang ho etsahala nakong ea ho pepa le ho sebetsa.
Ntho e 'ngoe ea bohlokoa ea sethala sa FAST-POCT ke tokollo ea eona e hlokahalang, e leng tlhokahalo ea bohlokoa bakeng sa tlhahlobo ea bongata.Ka feiga.3d e bapisa tokollo e batloang ke sethala sa FAST-POCT le sesebelisoa sa CV.Ho tloha feiga.3d (iii) rea bona hore sesebelisoa sa FAST se arabela ka potlako ho letšoao la khatello.Ha khatello e sebelisoa sethaleng sa FAST-POCT, mokelikeli o ile oa phalla, ha khatello e lokolloa, phallo e ile ea emisa hang-hang (setšoantšo sa 3d (i)).Ketso ena e ka hlalosoa ka ho khutla ka potlako ha hinge, e hatellang lever ka morao ho thibela, ho koala kamore.Leha ho le joalo, mokelikeli o ile oa tsoela pele ho phalla mochine oa CV, qetellong o fella ka molumo oa mokelikeli o sa lebelloang oa hoo e ka bang 100 µl ka mor'a hore khatello e lokolloe (Figure 3d(ii) le Supplementary Movie S4).Sena se ka hlalosoa ka ho nyamela ha phello ea "capillary pinning" holim'a ho kolobisa ka ho feletseng ha CV ka mor'a ente ea pele.
Bokhoni ba ho sebetsana le maro a mefuta e fapaneng ea mongobo le viscosity sesebelisoa se le seng e ntse e le phephetso bakeng sa lits'ebetso tsa POCT.Ho fokola ha metsi ho ka lebisa ho lutla kapa boitšoaro bo bong bo sa lebelloang ba phallo likanaleng, 'me lisebelisoa tse ling tse kang li-mixers tsa vortex, centrifuges le li-filters li atisa ho hlokoa ho lokisetsa metsi a nang le viscous haholo 52.Re ile ra leka kamano pakeng tsa khatello e matla le thepa ea mokelikeli (e nang le mefuta e mengata ea metsi le viscosity).Liphetho li bontšoa ho Lethathamo la 1 le Video S5.Ho ka bonoa hore metsi a nang le metsi a fapaneng le a viscosity a ka tiisetsoa ka kamoreng, 'me ha khatello e sebelisoa, esita le metsi a nang le viscosity ea ho fihlela ho 5500 cP a ka fetisetsoa kamoreng e haufi, e leng se etsang hore ho khonehe ho lemoha lisampole tse nang le matla a phahameng. viscosity (e leng sekhohlela, mohlala o hlakileng haholo o sebelisetsoang ho hlahloba mafu a ho hema).
Ka ho kopanya lisebelisoa tse kaholimo tse sebetsang ka bongata, ho ka etsoa lisebelisoa tse ngata tse fapaneng tsa POCT tse thehiloeng ho FAST.Mohlala o bontšoa ho Setšoantšo sa 1. Semela se na le kamore ea ho boloka pele, kamore ea ho kopanya, kamore ea ho itšoara le kamore ea litšila.Li-reagents li ka bolokoa ka phaposing ea polokelo ea pele nako e telele ebe li lahleloa ka phaposing ea ho kopanya.Ka khatello e nepahetseng, li-reactants tse tsoakiloeng li ka fetisetsoa ka mokhoa o ikhethileng kamoreng ea litšila kapa kamoreng ea ho itšoara.
Hobane tlhahlobo ea PCR ke tekanyetso ea khauta ea ho lemoha likokoana-hloko tse kang H1N1 le COVID-19 'me e kenyelletsa mehato e mengata ea karabelo, re sebelisitse sethala sa FAST-POCT bakeng sa ho lemoha PCR joalo ka ts'ebeliso.Ka feiga.4 e bonts'a ts'ebetso ea tlhahlobo ea PCR e sebelisa sethala sa FAST-POCT.Ntlha ea pele, reagent ea eluting, magnetic microbead reagent, tharollo ea ho hlatsoa A, le tharollo ea ho hlatsoa W li ne li kenngoa ka liphaepheng tsa pele tsa polokelo E, M, W1 le W2, ka ho latellana.Mekhahlelo ea papatso ea RNA e bontšoa ho feiga.4a 'me ke tse latelang: (1) ha khatello ea P1 (= 0.26 bar) e sebelisoa, sampuli e fetela ka kamoreng ea M ebe e lokolloa ka kamoreng ea ho kopanya.(2) Khatello ea moea P2 (= 0.12 bar) e fanoa ka sekepe sa A se kopantsoeng ka tlaase ho kamoreng ea ho kopanya.Le hoja mekhoa e mengata ea ho kopanya e bontšitse bokhoni ba bona ba ho kopanya metsi ho li-platform tsa POCT (mohlala ho kopanya noha 53, ho kopanya ka mokhoa o sa reroang 54 le ho kopanya batch 55), katleho ea bona ea ho kopanya le katleho e ntse e sa khotsofatse.E amohela mokhoa oa ho kopanya bubble, oo moea o kenngoa ka tlaase ho kamoreng ea ho kopanya ho etsa li-bubble ka har'a mokelikeli, ka mor'a moo vortex e matla e ka finyella ho kopanya ka ho feletseng ka metsotsoana.Ho ile ha etsoa liteko tsa ho kopanya li-bubble 'me liphetho li hlahisoa ho Supplementary Figure S6.Ho ka bonoa hore ha khatello ea 0.10 bar e sebelisoa, ho kopanya ho feletseng ho nka metsotsoana ea 8.Ka ho eketsa khatello ho 0.20 bar, ho kopanya ho feletseng ho finyelloa ka metsotsoana e ka bang 2.Mekhoa ea ho bala bokhoni ba ho kopanya e hlahisoa karolong ea Mekhoa.(3) Sebelisa makenete ea rubidium ho ntša lifaha, ebe u hatella P3 (= 0.17 bar) ka port P ho tsamaisa li-reagents ka kamoreng ea litšila.Ka feiga.4b,c e bontša mehato ea ho hlatsoa ho tlosa litšila ho tloha sampuling ka tsela e latelang: (1) Tharollo ea ho hlatsoa A e tsoang ka kamoreng ea W1 e kenngoa ka kamoreng ea ho kopanya khatello ea P1.(2) Ebe u etsa mokhoa oa ho kopanya bubble.(3) Tharollo ea ho hlatsoa A e fetisetsoa ka kamoreng ea mokelikeli oa litšila, 'me li-microbead tse ka kamoreng ea ho kopanya li ntšoa ke makenete.Ho hlatsoa W (Fig. 4c) ho ne ho tšoana le ho hlatsoa A (Setšoantšo sa 4b).Ho lokela ho hlokomeloa hore mohato o mong le o mong oa ho hlatsoa A le W o entsoe habeli.Setšoantšo sa 4d se bontša mehato ea elution ho elute RNA ho tloha lifaha;the elution and mixing introduction steps are the same as the RNA adsorption and hlatsoa mehato e hlalositsoeng ka holimo.Ha li-reagents tsa elution li fetisetsoa ka kamoreng ea karabelo ea PCR tlas'a khatello ea P3 le P4 (= 0.23 bar), khatello e boima e fihla ho tiisa letsoho la kamore ea ho arabela ea PCR.Ka mokhoa o ts'oanang, khatello ea P4 e boetse e thusa ho tiisa tsela e eang kamoreng ea litšila.Kahoo, li-reagents tsohle tsa elution li ile tsa ajoa ka ho lekana har'a likamore tse 'ne tsa karabelo ea PCR ho qala karabelo ea PCR e ngata.Mokhoa o ka holimo o hlahisoa ho Supplementary Movie S6.
Mohatong oa adsorption ea RNA, sampuli e kenngoa ka sekoting sa M ebe e kenngoa ka kamoreng ea ho kopanya hammoho le tharollo ea lifaha tse bolokiloeng pele.Ka mor'a ho kopanya le ho tlosa li-granules, li-reagents li ajoa ka kamoreng ea litšila.b le c ho hlatsoa mehato, hlahisa li-reagents tse fapaneng tse bolokiloeng esale pele ka kamoreng ea ho kopanya, 'me ka mor'a ho kopanya le ho tlosa lifaha, fetisetsa li-reagents kamoreng ea mokelikeli oa litšila.d Mohato oa Elution: Kamora ho hlahisa li-reagents tsa elution, ho kopanya le ho ntša lifaha, li-reagents li fetisetsoa kamoreng ea karabelo ea PCR.Li-curve li bonts'a ts'ebetso ea mosebetsi le likarolo tse amanang le mekhahlelo e fapaneng.Khatello ke khatello e hlahisoang ke likamore ka bomong.Bolumo ke molumo oa mokelikeli ka kamoreng ea ho kopanya.Likarolo tsohle tsa sekala ke 1 cm.Lintlha tse tala li fanoa e le lifaele tsa data tse tala.
Ho ile ha etsoa ts'ebetso ea tlhahlobo ea PCR 'me Supplementary Figure S7 e hlahisa liprofaele tsa mocheso tse kenyelletsang metsotso e 20 ea nako ea ho khutlisa le metsotso e 60 ea nako ea ho palama baesekele e futhumetseng (95 le 60 °C), 'me potoloho e le' ngoe ea mocheso e le 90 s (Supplementary Movie S7)..FAST-POCT e hloka nako e fokolang ea ho qeta nako e le 'ngoe ea mocheso (metsotsoana e 90) ho feta RT-PCR e tloaelehileng (metsotsoana e 180 bakeng sa potoloho e le' ngoe ea mocheso).Sena se ka hlalosoa ke sebaka se phahameng sa sebaka ho ea ho tekanyo ea molumo le mocheso o tlase oa mocheso oa kamore ea micro-PCR ea karabelo.Bokaholimo ba kamore ke 96.6 mm2 mme bophahamo ba kamore ke 25 mm3, ho etsa hore bokaholimo ba bophahamo ba molumo bo ka bang 3.86.Joalokaha ho bonoa ho Supplementary Figure S10, sebaka sa tlhahlobo sa PCR sa sethala sa rona se na le groove karolong e ka morao, e etsang hore botebo ba kamore ea PCR e be 200 µm.Thermally conductive elastic pad e khomaretsoe holim'a mocheso o futhumatsang oa molaoli oa mocheso, ho etsa bonnete ba hore o kopana ka thata le ka morao ea lebokose la tlhahlobo.Sena se fokotsa mocheso oa mocheso oa sethala le ho ntlafatsa ts'ebetso ea ho futhumatsa / ho pholile.Nakong ea libaesekele tse futhumetseng, parafine e kentsoeng sethaleng e qhibiliha 'me e phalla ka kamoreng ea ho arabela ea PCR, e sebetsa e le sealant ho thibela mouoane oa reagent le tšilafalo ea tikoloho (bona Supplementary Movie S8).
Mekhoa eohle ea ho lemoha PCR e hlalositsoeng ka holimo e ne e sebelisoa ka ho feletseng ho sebelisa sesebelisoa sa FAST-POCT se entsoeng ka tloaelo, se nang le mochine o hlophisitsoeng oa ho laola khatello, mochine oa ho ntša matla a khoheli, mochine oa ho laola mocheso, le mochine oa ho tšoara lets'oao la fluorescent.Ela hloko, re sebelisitse sethala sa FAST-POCT bakeng sa ho itšehla thajana ea RNA ebe re sebelisa lisampole tse nkiloeng tsa RNA bakeng sa karabelo ea PCR re sebelisa sistimi ea FAST-POCT le sistimi ea PCR ea komporo ho bapisa.Liphetho li ne li batla li tšoana le tse bontšitsoeng ho Supplementary Figure S8.Mokhanni o etsa mosebetsi o bonolo: o kenyelletsa sampuli ka kamoreng ea M mme o kenya sethala ka har'a sesebelisoa.Liphetho tsa tlhahlobo ea lipalo li fumaneha ka mor'a metsotso e ka bang 82.Lintlha tse qaqileng mabapi le lisebelisoa tsa FAST-POCT li ka fumanoa ho palo ea tlatsetso.C9, C10 le C11.
Influenza e bakoang ke likokoana-hloko tsa ntaramane A (IAV), B (IBV), C (ICV) le D (IDV) ke ntho e tloaelehileng lefatšeng ka bophara.Ho tsena, IAV le IBV li ikarabella bakeng sa linyeoe tse matla ka ho fetesisa le mafu a seoa a selemo, a tšoaetsa 5-15% ea baahi ba lefats'e, e bakang linyeoe tse matla tse limilione tse 3-5 mme e baka mafu a 290,000-650,000 selemo le selemo.Mafu a ho hema56,57.Tlhahlobo ea pele ea IAV le IB e bohlokoa ho fokotsa ho kula le moroalo o amanang le moruo.Har'a mekhoa e fumanehang ea ho hlahloba, reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) e nkoa e le e hlokolosi ka ho fetisisa, e tobileng le e nepahetseng (> 99%) 58,59.Har'a mekhoa e fumanehang ea ho hlahloba, reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) e nkoa e le e hlokolosi ka ho fetisisa, e tobileng le e nepahetseng (> 99%) 58,59.Среди доступных диагностических методов полимеразная цепная реакция с обратной транскриптазой (ОТ-ПЦР) сказал > 99%)58,59.Har'a mekhoa e fumanehang ea ho hlahloba, reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) e nkoa e le e hlokolosi ka ho fetisisa, e tobileng le e nepahetseng (> 99%) 58,59. Из доступных диагностических методов полимеразная цепная реакция с обратной транскриптазой (ОТ-ПЦР) считается наийболее чулье, песни 99%)58,59.Har'a mekhoa e fumanehang ea ho hlahloba, reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) e nkoa e le e hlokolosi ka ho fetisisa, e tobileng le e nepahetseng (> 99%) 58,59.Leha ho le joalo, mekhoa ea setso ea RT-PCR e hloka lipeipi tse pheta-phetoang, ho kopanya, ho fana le ho fetisa mokelikeli, ho fokotsa tšebeliso ea bona ke litsebi maemong a fokolang a lisebelisoa.Mona, sethala sa FAST-POCT se ne se sebelisetsoa ho lemoha PCR ea IAV le IBV, ka ho latellana, ho fumana moeli oa bona o tlaase oa ho lemoha (LOD).Ho phaella moo, IAV le IBV li 'nile tsa atisa ho khetholla pakeng tsa mefuta e fapaneng ea likokoana-hloko ho pholletsa le mefuta, ho fana ka sethala se tšepisang bakeng sa tlhahlobo ea liphatsa tsa lefutso le bokhoni ba ho phekola lefu lena ka nepo.
Ka feiga.5a e bontša liphetho tsa tlhahlobo ea HAV PCR ho sebelisoa 150 µl ea purified viral RNA e le sampole.Ka feiga.5a (i) e bonts'a hore ka har'a khatello ea HAV ea likopi tse 106 / ml, matla a fluorescence (ΔRn) a ka fihla ho 0.830, mme ha mahloriso a fokotsehile ho likopi tsa 102 / ml, ΔRn e ntse e ka fihla ho 0.365, e tsamaellanang le holimo ho feta moo. ea sehlopha se se nang letho sa taolo e mpe (0.002), hoo e ka bang makhetlo a 100 holimo.Bakeng sa quantification e thehiloeng litekong tse tšeletseng tse ikemetseng, sekhahla sa calibration sa linear se ile sa hlahisoa pakeng tsa mahloriso a log le cycle threshold (Ct) ea IAV (Fig. 5a (ii)), R2 = 0.993, ho tloha ho 102-106 likopi / mL.liphetho li lumellana hantle le mekhoa e tloaelehileng ea RT-PCR.Ka feiga.5a(iii) e bonts'a litšoantšo tsa fluorescent tsa liphetho tsa liteko ka mor'a lipotoloho tse 40 tsa sethala sa FAST-POCT.Re fumane hore sethala sa FAST-POCT se ka bona HAV e le tlase ho likopi tse 102 / mL.Leha ho le joalo, mokhoa oa setso ha o na boleng ba Ct ho likopi tse 102/mL, e leng se etsang hore e be LOD ea likopi tse ka bang 103/mL.Re ile ra nahana hore sena se ka bakoa ke bokhoni bo phahameng ba ho kopanya li-bubble.Liteko tsa liteko tsa PCR li entsoe ho IAV RNA e hloekisitsoeng ho lekola mekhoa e fapaneng ea ho kopanya, ho kenyelletsa ho kopanya shake (mokhoa o ts'oanang oa ho kopanya joalo ka ts'ebetso e tloaelehileng ea RT-PCR), ho kopanya vial (mokhoa ona, 3 s ho 0.12 bar) mme ha ho na ho kopanya joalo ka sehlopha sa taolo. ..Liphetho li ka fumanoa ho Supplementary Figure S12.Hoa hlokomeleha hore maemong a holimo a RNA (likopi tse 106 / mL), litekanyetso tsa Ct tsa mekhoa e fapaneng ea ho kopanya li batla li tšoana le tsa ho kopanya bubble.Ha mahloriso a RNA a theohela ho likopi tsa 102 / mL, motsoako oa shake le li-control li ne li se na litekanyetso tsa Ct, ha mokhoa oa ho kopanya bubble o ntse o fana ka boleng ba Ct ba 36.9, bo neng bo le ka tlase ho moeli oa Ct oa 38. Liphello li bontša tšobotsi e ka sehloohong ea ho kopanya. li-vesicles, tse 'nileng tsa bontšoa hape libukeng tse ling, tse ka' nang tsa hlalosa hore na ke hobane'ng ha kutloisiso ea sethala sa FAST-POCT e phahame hanyenyane ho feta RT-PCR e tloaelehileng.Ka feiga.5b e bonts'a liphetho tsa tlhahlobo ea PCR ea lisampole tse hloekisitsoeng tsa IBV RNA ho tloha ho 101 ho isa ho 106 likopi / ml.Liphetho li ne li tšoana le tlhahlobo ea IAV, ho fihlela R2 = 0.994 le LOD ea likopi tse 102/mL.
tlhahlobo ea PCR ea kokoana-hloko ea ntaramane A (IAV) e nang le maikutlo a IAV ho tloha ho 106 ho isa ho 101 likopi / mL ho sebelisa TE buffer e le taolo e mpe (NC).(i) Nako ea 'nete ea nako ea fluorescence curve.(ii) Linear calibration curve between logarithmic IAV RNA concentration and cycle threshold (Ct) bakeng sa FAST le mekhoa e tloaelehileng ea tlhahlobo.(iii) Setšoantšo sa fluorescent sa IAV FAST-POCT ka mor'a lipotoloho tse 40.b, PCR ho lemoha kokoana-hloko ea ntaramane ea B (IBV) ka (i) mahlaseli a nako ea sebele a fluorescence.(ii) Linear calibration curve le (iii) FAST-POCT IBV fluorescence image after 40 cycles.Moeli o ka tlaase oa ho lemoha (LOD) bakeng sa IAV le IBV ho sebelisa sethala sa FAST-POCT e ne e le likopi tsa 102 / mL, tse tlaase ho feta mekhoa e tloaelehileng (103 likopi / mL).c Liphetho tsa liteko tse ngata tsa IAV le IBV.GAPDH e ne e sebelisoa e le taolo e nepahetseng 'me TE buffer e ne e sebelisoa e le taolo e mpe ho thibela tšilafalo e ka bang teng le ho holisa bokamorao.Mefuta e mene e fapaneng ea mehlala e ka khetholloa: (1) lisampole tse mpe tsa GAPDH feela (“IAV-/IBV-”);(2) tšoaetso ea IAV ("IAV +/IBV-") e nang le IAV le GAPDH;(3) Tšoaetso ea IBV ("IAV-/IBV +") le IBV le GAPDH;(4) Tšoaetso ea IAV/IBV (“IAV+/IBV+”) ka IAV, IBV le GAPDH.Mola o matheba o emetse moeli.n = 6 liteko tse ikemetseng tsa baeloji li ile tsa etsoa, data e bontšoa e le ± kheloha e tloaelehileng.Lintlha tse tala li hlahisoa e le lifaele tsa data tse tala.
Ka feiga.5c e bontša liphetho tsa tlhahlobo ea multiplexing bakeng sa IAV/IBV.Mona, kokoana-hloko ea lysate e ne e sebelisoa e le sampuli ea tharollo sebakeng sa RNA e hloekisitsoeng, 'me li-primers tse' nè tsa IAV, IBV, GAPDH (taolo e ntle) le TE buffer (taolo e mpe) li kenyelelitsoe likamoreng tse 'nè tse fapaneng tsa ho arabela sethaleng sa FAST-POCT.Litaolo tse ntle le tse mpe li sebelisoa mona ho thibela tšilafalo e ka bang teng le ntlafatso ea bokamorao.Liteko li ne li arotsoe ka lihlopha tse 'nè: (1) GAPDH-negative sampuli ("IAV-/IBV-");(2) IAV e tšoaelitsoeng ("IAV +/IBV-") khahlanong le IAV le GAPDH;(3) IBV-.tšoaetso (“IAV-”) -/IBV+”) IBV le GAPDH;(4) IAV / IBV ("IAV +/IBV +") tšoaetso ea IAV, IBV le GAPDH.Ka feiga.5c e bonts'a hore ha lisampole tse mpe li sebelisoa, matla a fluorescence ΔRn ea kamore ea taolo e ntle e ne e le 0.860, 'me ΔRn ea IAV le IBV e ne e tšoana le taolo e mpe (0.002).Bakeng sa lihlopha tsa IAV+/IBV-, IAV-/IBV+ le IAV+/IBV+, lik'hamera tsa IAV/GAPDH, IBV/GAPDH le IAV/IBV/GAPDH li bontšitse matla a maholo a fluorescence, ka ho latellana, ha lik'hamera tse ling li bile li bonts'a matla a fluorescence ka morao. boemo ba 40 kamora ho palama baesekele e futhumetseng.Ho tsoa litekong tse kaholimo, sethala sa FAST-POCT se bonts'itse boits'oaro bo ikhethang mme se re lumelletse hore ka nako e le 'ngoe re tšoaee likokoana-hloko tse fapaneng tsa ntaramane.
Ho netefatsa ts'ebeliso ea bongaka ea FAST-POCT, re ile ra leka mehlala ea kliniki ea 36 (li-nose swab specimens) ho tsoa ho bakuli ba IB (n=18) le li-control tse seng tsa IB (n=18) (Setšoantšo sa 6a).Boitsebiso ba mokuli bo hlahisoa ho Letlapa la Tlatsetso ea 3. Boemo ba ts'oaetso ea IB bo tiisitsoe ka boithaopo 'me protocol ea thuto e ile ea amoheloa ke Sepetlele sa Pele sa Selekane sa Zhejiang University (Hangzhou, Zhejiang).Mohlala o mong le o mong oa bakuli o ne o arotsoe ka mekhahlelo e 'meli.E 'ngoe e ne e sebetsoa ho sebelisoa FAST-POCT ha e' ngoe e sebetsoa ka sistimi ea PCR ea desktop (SLAN-96P, China).Litlhahlobo ka bobeli li sebelisa lisebelisoa tse tšoanang tsa tlhoekiso le ho lemoha.Ka feiga.6b e bonts'a liphetho tsa FAST-POCT le transcription e tloaelehileng ea reverse PCR (RT-PCR).Re ile ra bapisa matla a fluorescence (FAST-POCT) le -log2 (Ct), moo Ct e leng moeli oa potoloho bakeng sa RT-PCR e tloaelehileng.Ho ne ho e-na le tumellano e ntle pakeng tsa mekhoa e 'meli.FAST-POCT le RT-PCR li bontšitse kamano e matla e ntle le tekanyo ea tekanyo ea Pearson (r) ea 0.90 (Setšoantšo sa 6b).Ka mor'a moo re ile ra hlahloba ho nepahala ha tlhahlobo ea FAST-POCT.Likabelo tsa matla a Fluorescence (FL) bakeng sa lisampole tse ntle le tse mpe li ile tsa fanoa e le tekanyo e ikemetseng ea ho hlahloba (setšoantšo sa 6c).Litekanyetso tsa FL li ne li phahame haholo ho bakuli ba IB ho feta taolong (**** P = 3.31 × 10-19; teko ea t-tailed e 'meli) (Setšoantšo sa 6d).Ka mor'a moo, li-curve tsa IBV receiver operating (ROC) li ile tsa raloa.Re fumane hore ho nepahala ha ho hlahlojoa ho ne ho le molemo haholo, ho na le sebaka se tlas'a lekhalo la 1 (setšoantšo sa 6e).Ka kopo elelloa hore ka lebaka la ho odara maske e tlamang naheng ea China ka lebaka la COVID-19 ho tloha ka 2020, ha re so supe bakuli ba nang le IBD, kahoo mefuta eohle e ntle ea kliniki (ke hore, mehlala ea nasal swab) e ne e le ea IBV feela.
Moralo oa thuto ea bongaka.Kakaretso ea lisampole tsa 36, ho kenyelletsa le mehlala ea bakuli ba 18 le li-control tsa 18 tse se nang feberu, li ile tsa hlahlojoa ho sebelisoa sethala sa FAST-POCT le RT-PCR e tloaelehileng.b Lekola ho lumellana ha tlhahlobo pakeng tsa FAST-POCT PCR le RT-PCR e tloaelehileng.Liphetho li ne li amana hantle (Pearson r = 0.90).c Maemo a matla a Fluorescence ho bakuli ba 18 ba IB le li-control tse 18.d Ho bakuli ba IB (+), litekanyetso tsa FL li ne li phahame haholo ho feta sehlopheng sa taolo (-) (****P = 3.31 × 10-19; teko ea t-tailed; n = 36).Bakeng sa sebaka se seng le se seng sa lisekoere, lets'oao le letšo bohareng le emela bohareng, 'me mela e ka tlaase le e ka holimo ea lebokose e emela liphesente tse 25 le 75, ka ho latellana.Litelu li atoloha ho fihlela bonyane le lintlha tse phahameng tsa data, tse sa nkoe e le tse kantle ho naha.e ROC mothinya.Mola o matheba oa d o emela boleng ba moeli o hakantsoeng ho tsoa tlhahlobong ea ROC.AUC bakeng sa IBV ke 1. Lintlha tse tala li fanoa e le lifaele tsa data tse tala.
Sengoliloeng sena, re hlahisa FAST, e nang le litšobotsi tse hlokahalang bakeng sa POCT e nepahetseng.Melemo ea theknoloji ea rona e kenyelletsa: (1) Tekanyetso e fapaneng (cascade, nako e le 'ngoe, e latellanang le e khethang), ho lokolloa ha tlhokahalo (ho lokolloa ka potlako le ka tekanyo ea khatello e sebelisoang) le ts'ebetso e tšepahalang (ho sisinyeha ka likhato tse 150) (2) polokelo ea nako e telele. (lilemo tse 2 tsa tlhahlobo e potlakileng, ho theola boima ba 'mele ka 0.3%);(3) bokhoni ba ho sebetsa ka lino tse nang le mefuta e mengata ea metsi le viscosity (viscosity ho fihlela ho 5500 cP);(4) Moruo (Litšenyehelo tse hakantsoeng tsa sesebelisoa sa FAST-POCT PCR ke hoo e ka bang US $ 1).Ka ho kopanya li-dispensers tse nang le mesebetsi e mengata, sethala se kopantsoeng sa FAST-POCT bakeng sa ho lemoha PCR ea likokoana-hloko tsa ntaramane A le B se ile sa bontšoa le ho sebelisoa.FAST-POCT e nka metsotso e 82 feela.Liteko tsa kliniki tse nang le lisampole tse 36 tsa nasal swab li bonts'itse tumellano e ntle ho matla a fluorescence ka RT-PCR e tloaelehileng (Pearson coefficients> 0.9).Liteko tsa kliniki tse nang le lisampole tse 36 tsa nasal swab li bonts'itse tumellano e ntle ho matla a fluorescence ka RT-PCR e tloaelehileng (Pearson coefficients> 0.9).Клинические тесты с 36 образцами мазков из носа показали хорошее соответствие интенсивности флуоресценции стандартной ОТ-ПЦенция ОТ-ПЦенцийLiteko tsa bongaka tse nang le lisampole tse 36 tsa li-nasal swabs li bontšitse tumellano e ntle le matla a fluorescence a RT-PCR e tloaelehileng (Pearson's coefficients> 0.9).RT-PCR Клинические испытания 36 образцов мазков из носа показали хорошее совпадение интенсивности флуоресценции со стандартной ОТ-эфинции стандартной ОТ-эфинцийTeko ea tleliniki ea 36 nasal swab ea mehlala e bontšitse tumellano e ntle ea matla a fluorescence le RT-PCR e tloaelehileng (coefficient ea Pearson> 0.9).Ka mokhoa o ts'oanang le mosebetsi ona, mekhoa e fapaneng e hlahang ea biochemical (mohlala, plasma thermal cycling, amplification-free immunoassays, le nanobody functionalization assays) li bontšitse bokhoni ba tsona ho POCT.Leha ho le joalo, ka lebaka la khaello ea sethala sa POCT se kopantsoeng ka ho feletseng le se matla, mekhoa ena e hloka mekhoa e fapaneng ea pele ho ts'ebetso (mohlala, RNA isolation44, incubation45 le washing46), e tsoelang pele ho tlatsana le mosebetsi oa morao-rao ka mekhoa ena ea ho kenya ts'ebetsong mesebetsi e tsoetseng pele ea POCT. li-parameter tse hlokahalang.tshebetso ya ho lata-ka-karabelo.Mosebetsing ona, le hoja pompo ea moea e sebelisetsoang ho kenya valve ea FAST e nyenyane hoo e ka kopanngoang le sesebelisoa sa benchtop (Fig. S9, S10), e ntse e sebelisa matla a bohlokoa le ho hlahisa lerata.Haele hantle, lipompo tse nyane tsa mofuta oa pneumatic li ka nkeloa sebaka ke mekhoa e meng, joalo ka ts'ebeliso ea matla a motlakase kapa actuation ea menoana.Lintlafatso tse ling li ka kenyelletsa, ka mohlala, lisebelisoa tsa ho ikamahanya le maemo bakeng sa litlhahlobo tse fapaneng le tse khethehileng tsa biochemical, ho sebelisa mekhoa e mecha ea ho lemoha e sa hlokeng mekhoa ea ho futhumatsa / e pholileng, kahoo e fana ka sethala sa POCT se se nang lisebelisoa bakeng sa lisebelisoa tsa PCR.Re lumela hore ka lebaka la hore sethala sa FAST se fana ka mokhoa oa ho laola metsi, re lumela hore theknoloji e reriloeng ea FAST e fana ka monyetla oa ho theha sethala se tloaelehileng eseng feela bakeng sa tlhahlobo ea biomedical, empa hape le bakeng sa ho hlahloba tikoloho, tlhahlobo ea boleng ba lijo, lisebelisoa le motsoako oa lithethefatsi. ..
Pokello le ts'ebeliso ea mehlala ea linko tsa motho e amohetsoe ke Komiti ea Boitšoaro ea Sepetlele sa Pele se Kopanetsoeng sa Univesithi ea Zhejiang (IIT20220330B).Ho ile ha bokelloa lisampole tse 36 tsa nasal swab, tse kenyelletsang batho ba baholo ba 16 ba lilemo tse 30, batho ba baholo ba 7> lilemo tse 40, le banna ba 19, basali ba 17.Ho ile ha bokelloa lisampole tse 36 tsa nasal swab, tse kenyelletsang batho ba baholo ba 16 ba lilemo tse 30, batho ba baholo ba 7> lilemo tse 40, le banna ba 19, basali ba 17.Было собрано 36 образцов мазков из носа, в которых приняли участие 16 взрослых < 30 лет, 7 взрослых старше 40 лемун17 инге 19Ho ile ha bokelloa mehlala e mashome a mararo a metso e tšeletseng ho batho ba baholo ba 16 ba ka tlase ho lilemo tse 30, batho ba baholo ba 7 ho feta lilemo tse 40, banna ba 19 le basali ba 17..Lintlha tsa palo ea batho li hlahisoa ho Letlapa la Tlatsetso la 3. Tumello e nang le tsebo e fumanoe ho barupeluoa bohle.Barupeluoa bohle ba ne ba belaelloa hore ba na le ntaramane 'me ba ile ba lekoa ka boithatelo ntle le matšeliso.
Motheo oa FAST le sekwahelo li entsoe ka polylactic acid (PLA) 'me li hatisoa ke mochine oa khatiso oa Ender 3 Pro 3D (Shenzhen Transcend 3D Technology Co., Ltd.).Theipi e mahlakore a mabeli e rekiloe ho Adhesives Research, Inc. Model 90880. Filimi ea PET e boima ba 100 µm e rekiloe ho McMaster-Carr.Ka bobeli sekhomaretsi le filimi ea PET li ile tsa khaoloa ho sebelisoa Silhouette Cameo 2 cutter ho tloha Silhouette America, Inc. Filimi ea elastic e entsoe ka thepa ea PDMS ka ho bōptjoa ha ente.Taba ea pele, foreimi ea PET e boima ba 200 µm e ile ea khaoloa ho sebelisoa mochini oa laser 'me ea khomaretsoa letlapeng la PMMA le botenya ba 3 mm ho sebelisoa theipi ea sekhomaretsi ea 100 µm habeli.Selelekela sa PDMS (Sylgard 184; Karolo ea A: Karolo ea B = 10: 1, Dow Corning) e ile ea tšeloa ka har'a hlobo 'me ho sebelisoa molamu oa khalase ho tlosa PDMS e feteletseng.Ka mor'a ho folisa ka 70 ° C. bakeng sa lihora tse 3, filimi ea 300 μm e teteaneng ea PDMS e ne e ka ebola hlobo.
Lifoto tsa ho ajoa ka mokhoa o fapaneng, khatiso e batloang le ts'ebetso e tšepahalang li nkuoa ka kh'amera e lebelo haholo (Sony AX700 1000 fps).Orbital shaker e sebelisitsoeng tekong ea ho tšepahala e ile ea rekoa ho SCILOGEX (SCI-O180).Khatello ea moea e hlahisoa ke compressor ea moea, 'me li-regulator tse ngata tse nepahetseng tsa digital li sebelisoa ho fetola boleng ba khatello.Mokhoa oa ho hlahloba boitšoaro ba phallo ke o latelang.Palo e reriloeng esale pele ea mokelikeli e ile ea kenngoa ka har'a sesebelisoa sa teko 'me k'hamera ea lebelo le phahameng e ne e sebelisetsoa ho rekota boitšoaro ba ho phalla.Litšoantšo tse ntseng li le teng li ile tsa nkuoa ho tsoa livideong tsa boitšoaro ba phallo ka linako tse behiloeng, 'me sebaka se setseng se baloa ho sebelisoa software ea Image-Pro Plus, e ileng ea atolosoa ke botebo ba khamera ho bala molumo.Lintlha tsa mokhoa oa ho hlahloba boitšoaro ba phallo li ka fumanoa ho Supplementary Figure S4.
Kenya 50 µl ea li-microbeads le 100 µl ea metsi a ntšitsoeng ka har'a sesebelisoa sa ho kopanya vial.Lifoto tse tsoakiloeng tsa ts'ebetso li nkuoe ka kh'amera e lebelo le holimo metsotsoana e meng le e meng ea 0.1 ka khatello ea 0.1 bar, 0.15 bar le 0.2 bar.Tlhahisoleseding ea pixel nakong ea ts'ebetso ea ho kopanya e ka fumanoa litšoantšong tsena ho sebelisoa software ea ho lokisa lifoto (Photoshop CS6).'Me katleho ea ho kopanya e ka finyelloa ka Equation 53 e latelang.
moo M e leng bokhoni ba ho kopanya, N ke kakaretso ea palo ea lipikselse tsa sampuli, 'me ci le \(\bar{c}\) ke litekanyetso tse tloaelehileng le tse lebeletsoeng tse tloaelehileng.Ho kopanya katleho ho tloha ho 0 (0%, e sa tsoakoang) ho ea ho 1 (100%, e kopantsoe ka ho feletseng).Liphetho li bontšoa ho Supplementary Figure S6.
Nako ea sebele ea RT-PCR kit bakeng sa IAV le IBV, ho kenyeletsoa lisampole tsa IAV le IBV RNA (cat. no. RR-0051-02/RR-0052-02, Liferiver, China), Tris-EDTA buffer (TE buffer no. B541019 , Sangon Biotech, Chaena), Positive Control RNA Purification Kit (Karolo ea No. Z-ME-0010, Liferiver, Chaena) le Tharollo ea GAPDH (Karolo ea No. M591101, Sangon Biotech, Chaena) e fumaneha khoebong.Thepa ea tlhoekiso ea RNA e kenyelletsa sekheo se tlamang, ho hlatsoa A, ho hlatsoa W, li-eluent, li-microbeads tsa makenete, le sejari sa acrylic.IAV le IBV tsa nako ea sebele tsa RT-PCR li kenyelletsa motsoako oa IFVA nucleic acid PCR le enzyme ea RT-PCR.Kenya 6 µl ea AcrylCarrier le 20 µl ea lifaha tsa makenete ho 500 µl ea motsoako o tlamang oa buffer, sisinya hantle ebe o lokisa tharollo ea lifaha.Kenya 21 ml ea ethanol ho hlatsoa A le W, sisinya hantle ho fumana tharollo ea ho hlatsoa A le W, ka ho latellana.Joale, 18 µl ea motsoako oa fluorescent PCR o nang le IFVA nucleic acid le 1 µl ea enzyme ea RT-PCR e ile ea kenngoa ho 1 µl ea tharollo ea TE, ea sisinyeha le ho kenngoa bohareng ka metsotsoana e mengata, ho fumana 20 µl ea IAV le IBV primers.
Latela mokhoa o latelang oa tlhoekiso ea RNA: (1) RNA adsorption.Pipette 526 µl ea motsoako oa pellet ka har'a tube ea 1.5 ml centrifuge 'me u kenye 150 µl ea sampole, ebe ka letsoho u tsokotse tube holimo le tlase makhetlo a 10.Fetisetsa 676 µl ea motsoako ho affinity kholomo le centrifuge ho 1.88 x 104 g bakeng sa metsotsoana e 60.Li-drain tse latelang lia lahloa.(2) Mokhahlelo oa pele oa ho hlatsoa.Kenya 500 µl ea tharollo ea ho hlatsoa A ho kholomo ea affinity, centrifuge ho 1.88 x 104 g bakeng sa 40 s, 'me u lahle tharollo e sebelisitsoeng.Mokhoa ona oa ho hlatsoa o ile oa phetoa habeli.(3) mokhahlelo oa bobeli oa ho hlatsoa.Kenya 500 µl ea tharollo ea ho hlatsoa W ho kholomo ea affinity, centrifuge ho 1.88×104 g bakeng sa 15 s 'me u lahle tharollo e sebelisitsoeng.Mokhoa ona oa ho hlatsoa o ile oa phetoa habeli.(4) Tlhahiso.Kenya 200 µl ea eluate ho kholomo ea affinity le centrifuge ho 1.88 x 104 g bakeng sa 2 min.(5) RT-PCR: The eluate e ne e kenngoa ka 20 μl ea tharollo ea primer ka har'a tube ea PCR, ebe tube e kenngoa ka nako ea sebele ea lisebelisoa tsa tlhahlobo ea PCR (SLAN-96P) ho phethahatsa ts'ebetso ea RT-PCR.Ts'ebetso eohle ea ho lemoha e nka metsotso e ka bang 140 (metsotso e 20 bakeng sa tlhoekiso ea RNA le metsotso e 120 bakeng sa ho lemoha PCR).
526 µl ea tharollo ea lifaha, 1000 µl ea tharollo ea ho hlatsoa A, 1000 µl ea tharollo ea ho hlatsoa W, 200 µl ea eluate le 20 µl ea "primer solution" e ile ea kenyelletsoa pele 'me ea bolokoa ka kamoreng ea ho lemoha M, W1, W2, E le PCR.Kopano ea sethala.Joale, 150 µl ea sampole e ile ea tšeloa ka phaposing ea M mme sethala sa FAST-POCT se kentsoe sesebelisoa sa tlhahlobo se bontšitsoeng ho Supplementary Figure S9.Kamora metsotso e ka bang 82, liphetho tsa liteko li ile tsa fumaneha.
Ntle le ha ho boletsoe ka tsela e 'ngoe, liphetho tsohle tsa liteko li hlahisoa e le ± SD ka mor'a bonyane likopi tse tšeletseng tse sebelisang feela sethala sa FAST-POCT le disampole tse ikemetseng tsa baeloji.Ha ho lintlha tse qheletsoeng ka thoko tlhahlobisong.Liteko ha lia iketsahalla feela.Bafuputsi ba ne ba sa bone mesebetsi ea sehlopha nakong ea teko.
Bakeng sa tlhaiso-leseling e batsi mabapi le moralo oa thuto, bona Tlaleho ea Patlisiso ea Tlhaho e hokahaneng le sengoloa sena.
Lintlha tse tšehetsang liphetho tsa phuputso ena li fumaneha ho Litaba tsa Tlatsetso.Sengoliloeng sena se fana ka lintlha tsa mantlha.
Chagla, Z. & Madhukar, P. COVID-19 boosters linaheng tse ruileng li tla liehisa liente bakeng sa bohle.Chagla, Z. & Madhukar, P. COVID-19 boosters linaheng tse ruileng li tla liehisa liente bakeng sa bohle.Chagla, Z. le Madhukar, P. COVID-19 boosters linaheng tse ruileng li tla liehisa liente bakeng sa motho e mong le e mong.Chagla, Z. le Madhukar, P. COVID-19 revaccination linaheng tse ruileng e tla liehisa ente bakeng sa motho e mong le e mong.Meriana ea sechaba.27, 1659–1665 (2021).
Faust, L. et al.Teko ea SARS-CoV-2 linaheng tse nang le moputso o tlase le o mahareng: ho fumaneha le ho khoneha lekaleng la poraefete la bophelo bo botle.tšoaetso ea likokoana-hloko.22, 511–514 (2020).
Mokgatlo wa Lefatshe wa Bophelo bo Botle.Ho ata ha lefats'e le ho ata ha mafu a tšoaetsanoang ka thobalano a khethiloeng a phekolehang: tlhahlobo le likhakanyo.Geneva: WHO, WHO/HIV_AIDS/2 https://apps.who.int/iris/bitstream/handle/10665/66818/WHO_HIV_AIDS_2001.02.pdf (2001).
Fenton, EM le ba bang.Mefuta e mengata ea 2D e entsoeng ka mahlakoreng a tlhahlobo ea phallo.Sesebelisoa sa ASS.alma mater.Inter Milan.1, 124-129 (2009).
Schilling, KM et al.Sesebelisoa sa ho hlahloba pampiri se kentsoeng ka botlalo sa microfluidic.anus.Lik'hemik'hale.84, 1579–1585 (2012).
Lapenter, N. et al.Tlholisano ea immunochromatography e thehiloeng pampiring e kopantsoeng le li-electrode tse fetotsoeng ka enzyme e lumella ho lekola ka waelese le qeto ea electrochemical ea cotinine ea moroto.Li-Sensors 21, 1659 (2021).
Zhu, X. le ba bang.Ho lekanya li-biomarker tsa mafu tse nang le sethala sa mokelikeli sa nanozyme se kopantsoeng ka mokhoa o fapaneng se sebelisang glucometer.kutlo ea likokoana-hloko.Bioelectronics.126, 690–696 (2019).
Boo, S. et al.Letlapa la teko ea bokhachane bakeng sa ho lemoha libaktheria tsa pathogenic ka ho sebelisa concanavalin A-human chorionic gonadotropin-Cu3(PO4)2 hybrid nanoflowers, karohano ea makenete le ho bala ka bohlale ka fono.Microcomputer.Makasine.185, 464 (2018).